Holistic Integrative Oncology(HIO)是由中国抗癌协会与Springer Nature出版集团强强联合打造的一本旗舰英文大刊,主编为中国抗癌协会理事长樊代明院士。HIO是面向全球开放的自由获取同行评议期刊,设有专家述评、CACA指南、研究综述和原创论著四个栏目。日前,鼻咽癌专题文章已正式上线,可通过此链接浏览全文:https://www.springer.com/journal/44178/,敬请各位读者阅读和引用。以下为本专题原创论著文章的中英文摘要。
生物钟基因BMAL1及缺氧诱导因子HIF-1α对鼻咽癌细胞HONE1增殖、迁移和放疗敏感性影响的研究
金风
贵州医科大学附属肿瘤医院
目的
了解生物钟基因BMAL1及缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对鼻咽癌细胞HONE1增殖、迁移及放疗敏感性的影响,同时初步探讨生物钟基因BMAL1能否影响HIF-1α蛋白的表达,为进一步研究生物钟基因BMAL1与缺氧诱导因子HIF-1α的相关性奠定基础。
方法
构建BMAL1基因稳定过表达及敲低细胞株、HIF-1α基因敲低细胞株。通过WB了解BMAL1基因过表达及敲低细胞株中HIF-1α蛋白的表达情况。利用CCK-8细胞增殖实验、划痕实验分析细胞的增殖、迁移能力。流式细胞凋亡术分析放疗后的细胞凋亡情况,克隆形成实验检测不同剂量(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy)X线照射后,BMAL1及HIF-1α对鼻咽癌细胞HONE1放疗敏感性的影响。
结果
1、构建BMAL1基因的过表达及干扰慢病毒,有效地上调和下调了鼻咽癌细胞株HONE1中BMAL1蛋白的表达,构建HIF-1α基因的干扰慢病毒,有效地下调了鼻咽癌细胞株HONE1中HIF-1α蛋白的表达,并分别成功筛选出稳转鼻咽癌细胞株;Western blot结果显示,过表达BMAL1基因可以抑制鼻咽癌细胞HONE1中HIF-1α蛋白表达,敲低BMAL1基因可以促进鼻咽癌细胞HONE1中HIF-1α蛋白表达(P<0.05);2、CCK-8细胞增殖实验及划痕实验表明,过表达BMAL1基因或敲低HIF-1α基因能抑制鼻咽癌细胞HONE1的增殖能力及迁移能力(P<0.05);3、流式细胞凋亡术结果显示,8Gy照射72小时后,BMALl基因过表达组的细胞凋亡率高于过表达对照组,同样,HIF-1α基因敲低组的的细胞凋亡率高于敲低对照组(P<0.05)。不同剂量(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy)X射线照射后,克隆形成实验显示,BMALl基因过表达组或HIF-1α基因敲低组的克隆形成率、细胞存活分数均低于其阴性对照组(P<0.05),Sigmaplot软件分析结果显示BMAL1基因过表达组或HIF-1α基因敲低组D0、Dq、SF2值均低于阴性对照组,放射增敏比分别为1.381、1.063。
结论
过表达BMAL1基因或者敲低HIF-1α基因可以抑制鼻咽癌细胞HONE1增殖、迁移,增加放疗后的细胞凋亡率,提高放射敏感性;在鼻咽癌细胞HONE1中,过表达BMAL1基因可以抑制HIF-1α蛋白的表达,敲低BMAL1基因可以促进HIF-1α蛋白的表达。
关键词
生物钟基因BMAL1;缺氧诱导因子HIF-1α;鼻咽癌;细胞增殖;细胞迁移;放疗敏感性
全文浏览链接:https://link.springer.com/article/10.1007/s44178-023-00044-x
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